卒業研究
血小板凝集能検査におけるPRP作製時の遠心条件の検討
Investigation of Centrifugation Conditions for the Preparation of Platelet-Rich Plasma for Platelet Aggregation Testing
臨床検査技師科
長尾珠希
目的
血小板凝集能検査では、血小板が豊富な多血小板血漿(以下PRP)と乏血小板血漿(以下PPP)を使用する。PRP作製時には、ブレーキなし遠心といったゆっくりと減速する遠心操作が国際的に推奨されており、検査開始までに時間を要する。
一方、ブレーキあり遠心による血小板凝集能への影響については十分に検討されていない。そこで本研究では、PRP作製時のブレーキありの遠心条件が血小板凝集能に及ぼす影響を明らかにすることを目的とした。
方法
対象は大阪南医療センター臨床検査科のボランティア17名と実習生1名の計18名とした。PRPは採血後15分静置し、200Gで10分間、ブレーキありまたはブレーキなし遠心を実施して作製した。凝集能の測定にはCS-5100(Sysmex社)を使用し、凝集惹起物質はADPを用いた。また、健常者では通常濃度のADPにおいてPAL値が上限値である10を示す例が多く、遠心条件による差を評価しにくいことから、ADPを希釈して測定した希釈APAL値を評価指標とした。そして、両条件におけるPRPの濁度およびスメアを比較した。
結果
PRPの濁度を比較した結果、ブレーキあり・なしで差は認められなかった。また、血小板のスメアにおいても、両群とも血小板は均一に分布しており、血小板凝集や明らかな形態変化は認められなかった。
一方、希釈APAL値をt検定で比較したところ、ブレーキなし群が7.0±0.8(平均値±SD)、ブレーキあり群が7.6±1.0であり、ブレーキあり群で有意に高値を示した(p=0.00084)。このことから、ブレーキあり遠心は血小板凝集能に影響を及ぼす可能性が示唆された。
考察
ブレーキあり遠心では、遠心終了時の急激な減速に伴い、PRP中の血小板に乱流や一時的な機械的刺激が加わった可能性が考えられる。その結果、血小板が軽度に活性化し、ADPに対する反応性が亢進したことで、希釈APAL値が高値を示したと考えた。
以上より、ブレーキあり遠心は血小板凝集能に影響を及ぼす可能性が示唆された。そのため、血小板凝集能をより正確に評価するためには、従来推奨されているブレーキなし遠心を用いることが適切であると考えられた。
参考文献
- Cattaneo M et al.:Recommendations for the standardization of light transmission aggregometry:a consensus of the working party from the platelet physiology subcommittee of SSC/ISTH.J Thromb Haemost,1183-1189,2013
- 坂寄輔ら:全自動血液凝固測定装置CN-6000における血小板凝集レベルの基礎的検討および多血小板血漿の調製に関する情報提供.Sysmex Journal Web,1-12,2024
